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C18色谱柱厂家浅谈色谱柱的构成、维护、老化与再生
点击次数:513 发布时间:2018-02-02
     色谱柱是高效液相色谱的心脏,在高效液相色谱仪的使用中,保持色谱柱的柱效、容量和渗透特性,延长柱子的使用寿命非常重要。尽管经过数十年的发展,出现了各种各样的专用色谱柱,如制备柱、分析柱和各种微型柱,但色谱柱主体上仍由柱体、柱内填料和两端的接头组成。由于使用了高效填料,并不需要很长的柱长,常规分析柱多为15~30 cm的直型柱。由于高效液相色谱柱要承受系统高压,所以柱体一般选用金属材质。大部分色谱柱的接头为通用尺寸,可互换使用。
 
一、色谱柱的构成
 
     色谱柱由柱管、压帽、卡套(密封环)、筛板(滤片)、接头、螺丝等组成。柱管多用不锈钢制成,压力不高于70kkg/cm2时,也可采用厚壁玻璃或石英管,管内壁要求有很高的光洁度 。
 
    色谱柱两端的柱接头内装有筛板,是烧结不锈钢或钦合金,孔径0.2一20µm(5一10µm),取决于填料粒度,目的是防止填料漏出。
 
二、色谱柱的维护
 
1、柱的安装与拆卸 :色谱柱属易耗品,需要不断更换
 
2、柱污染的处理 :常见的柱污染有柱头烧结滤板堵塞、柱头内填料污染和柱内有盐结晶析出。
 
3、柱的贮存与管理 :色谱柱长期不用时,应进行适当的处理后保存。 
 
三、色谱柱的老化
 
1、目的:除去溶剂、水分、以及色谱柱制备过程中其他挥发性杂质;促进固定液均匀牢固的分布在担体上。
 
2、老化温度的选择应注意:足够高以除去不挥发物质;足够低以延长柱寿命和减少柱流失;温度越低老化时间应越长;不超过色谱柱的zui高使用温度
 
3、填充柱比毛细管柱应更经常、更严格的老化
 
4、填充柱老化时间应长些,可过夜;毛细管柱老化只能是轻度的,时间应短些,防止固定液流失。
 
5、老化好的色谱柱若不立即投入使用,应将其从柱箱中取出,两端盖上帽子,防止空气、水分或其他杂质的进入。
 
四、色谱柱的再生
 
1、反相柱的再生。采用以甲醇:水=95:5(V/V),纯甲醇,二氯甲烷等溶剂作流动相,顺次冲洗,每种流动相流经色谱柱的量为20一30倍色谱柱体积然后再以相反顺序冲洗色谱柱。
 
2、正相柱再生。顺次以正己烷、异丙醇、二氯甲烷、甲醇作流动相冲洗色谱柱每步注意平衡溶剂的顺序,不要颠倒每种流动相流经色谱柱的量为20—30倍柱体积(因异丙醇的粘度较大,冲洗过程中请随时注意调整冲洗的流速),用甲醇冲洗完后,再以相反的顺序冲洗色谱柱。要注意上述溶剂必需严格脱水。 
 
3、离子交换柱的再生。长时间在高pH值和高离子强度缓冲溶液中使用,将导致色谱柱离子交换能力降低。用稀酸缓冲溶液冲洗,可使阳离子柱再生;反之,用稀碱缓冲溶液冲洗,可使阴离子柱再生。

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